Перейти к содержимому

 

Фотография

Микроклональное размножение цитрусовых


  • Авторизуйтесь для ответа в теме
Сообщений в теме: 47

#1 1C_Nik

1C_Nik

    Участник

  • Пользователи
  • PipPipPip
  • 84 сообщений
  • Меня зовут:Павел
  • Пол:
  • Город:Сочи
  • Коллекция:посмотреть

Отправлено 17 Февраль 2019 - 20:51

Вопрос к уважаемым цитрусоводам: кто-нибудь занимался подобным размножением цитрусовых?

 

преимущества:

 

- возможность получения не зараженных саженцев

- быстрое размножение особо ценных и/или трудно размножаемых растений

- ускорение селекции путем отбора мутантных форм in vitro

 

недостатки:

- трудно воспроизводимая в домашних условиях технология

- недешевые реактивы и оборудование

- необходимы базовые знания химии, биологии и навыки лабораторной работы

 

Далее приведу некоторые источники по теме.

 

по ссылке ниже автореферат на соискание КБН Самариной Л.С., по теме: "ОПТИМИЗАЦИЯ ПРИЕМОВ МИКРОРАЗМНОЖЕНИЯ И СОХРАНЕНИЯ ЛИМОНА IN VITRO"

 

http://doc.knigi-x.r...imona-vitro.php



#2 1C_Nik

1C_Nik

    Участник

  • Пользователи
  • PipPipPip
  • 84 сообщений
  • Меня зовут:Павел
  • Пол:
  • Город:Сочи
  • Коллекция:посмотреть

Отправлено 17 Февраль 2019 - 20:54

Микроклонирование - это реальная альтернатива среди традиционных методов размножения растений. Оно позволяет получать взрослые растения из малых частей, т.к. часть стебля, сегмент листа или корня, выращенные в асептическом (отсутствие микроорганизмов) контейнере с возможностью полного контроля среды. Получаемые растения полностью идентичны растениям - родителям. Выращивание «in vitro» производится в лабораторных условиях, но при соблюдении некоторых требований данные эксперименты могут быть успешно осуществлены у вас дома.
Оборудование, необходимое для выращивания культуры «in vitro»:
1.   Стерильное помещение, в котором будут производиться все операции. Идеально может подойти аквариум 50/40/40.
2.   Духовой шкаф для стерилизации посуды, инструмента и т.д.
3.   Стеклянные или пластиковые контейнеры с крышками, обладающие достаточной термостойкостью
4.   Скальпель и шипцы
5.   Офисная бумага формата А4
6.   Спиртовка
7.   Аэрозоль, содержащий 70% спирта для обработки поверхностей
8.   Хлоросодержащее дезинфицирующее средсто для обработки растений
9.   Дезинфицирующее средство для рук
10.   Питательная среда для растений
Приготовление питательной среды
Традиционно в роли питательной среды выступает среда MS (Мурасиге-Скуга), которую можно приобрести в некоторых химических компаниях. Но также можно самостоятельно приготовить подходящую питательную среду. Все составляющие широко доступны:
1.   2 чашки кипяченной воды
2.   1 часть сахарного песка
3.   Разведенное удобрение ( половина от нормы NPK 10/10/10 в 1 литре воды)
4.   Таблетка Иноситола 250 мг.
5.   ½ таблетки мультивитамина ( с тиамином)
6.   4 части агара
Это базовая среда. Для приготовления среды в целях мультипликации и укоренения необходимо добавить ½ часть кокосового молока и ½ чайной ложки солода. В итоге на нужно получить среду с Ph в диапазоне от 5 до 6. Если то не так, то необходимо добиться этих показателей путем подкисления (лимонная кислота) или подщелачивания (пищевая сода). Смешайте все перечисленные компоненты в кастрюле и варите на медленном огне до растворения агара. Затем разлейте получившуюся жидкость по подготовленным емкостям (примерно по 2 см.). Закройте емкости и поместите их в духовой шкаф на 15 минут для стерилизации.
Стерилизация инструментов и другого оборудования
Щипцы и скальпели могут стерилизоваться, будучи обернутыми в фольгу в духовом шкафу в течение 15 минут. Также их можно стерилизовать в хлорной жидкости или в спирте с последующим прокаливанием над огнем.
Стерильная вода необходима для того, чтобы ополаскивать растение, а стерильная бумага для того, чтобы его можно было просушить.Вода может стерилизоваться в стеклянных емкостях. Бумага в бумажном пакете стерилизуется паром в духовом шкафу над водой.
Стерлизация растительного материала
Весь материал необходимо стерилизовать в хлоросодержащей жидкости (подойдет отбеливатель)+ 3/4 воды + 1 часть моющего средства, которое снизит поверхностное натяжение ). Стерилизация занимает 10-20 минут. Производите периодическое взбалтывание. Этот процесс убьет бактерии и грибы. При более длительном отмачивание может произойти отмирание растительной ткани, будьте внимательны. Промойте растение дважды в стерильной воде.
Операции в стерильном помещение
К последующим операциям необходимо подойти с особым вниманием, чтобы не позволить микроорганизмам помешать вашей работе:
1.   Спрячьте волосы, засучите рукава и удалите часы и другие драгоценности. Вымойте свои руки дезинфицирующим средством, подходящим для кожи. Наденьте стерильные перчатки.
2.   Стерилизуйте внутреннюю часть аквариума спиртовым аэрозолем и вытрите стерильной бумагой.
3.   Расставьте все инструменты которые понадобятся вам в работе.
4.   Работая в аквариуме, возьмите стерильный растительный материал из емкости с помощью щипцов. Стерилизуйте свои инструменты, опуская их в алкоголь между каждой операцией. Допускается использование стебля с небольшими листочками, если листья большие их следует укоротить. В каждый контейнер помещают по одной части матерала. Затем контейнеры плотно закрывают крышкой и ставят в слегка освещенное место на месяц. В течение этого времени некоторые растения могут погибнуть из-за обработки хлором, некоторые будут заражены микроорганизмами, а некоторые начнут быстро расти в стерильных контейнерах. От зараженных растений необходимо избавиться.
Мультипликация
В течение месяца выжившие растения заметно выросли и их необходимо пересадить на среду, содержащую кокосовое молоко. Кокосовое молоко содержит вещества, способствующие быстрой сегментации и мультипликации растения. При пересадке растения необходимо повторить все вышеперечисленные операции, за исключением обработки растения хлоросодержащей жидкостью. Операции проводятся в стерильном аквариуме на влажной стерильной бумаге. Влажность необходима для растения, которое является достаточно мягким и может быстро высохнуть.
Формирование корня
Как только растение достигло как минимум 2 см в высоту можно начать процесс укоренения. Растение по привычной схеме пересаживается в среду из кокосового молока и солода. судно культуры. Корни формируются в течение двух - четырех недель.
Пересадка в почву (акклиматизация)
На данном этапе подготовленные горшки заполняют стерильной почвенной смесью без добавления удобрений. В почве делают небольшое углубление.
С помощью пинцета достают растение из контейнера и отмывают теплой водой остатки агара с корней. Растение помещают в углубление, увлажняют из распылителя и накрывают горшок прозрачным колпаком. Постепенно приучайте растение к окружающей среде, периодически снимая колпак. Акклиматизация происходит в течение 4-6 недель. Затем переходят к привычном методам выращивания.
 


#3 1C_Nik

1C_Nik

    Участник

  • Пользователи
  • PipPipPip
  • 84 сообщений
  • Меня зовут:Павел
  • Пол:
  • Город:Сочи
  • Коллекция:посмотреть

Отправлено 17 Февраль 2019 - 20:56

Нашел так-же группу энтузиастов в ВК:

 

 

Имея ясный ум и твёрдую память, мне захотелось заняться меристемным размножением растений (микроклонирование, клональное микроразмножение). Беглый анализ показал, что никакого заоблачного оборудования или других специальных условий для меристемного размножения в домашней лаборатории не требуется. В этой группе будет собираться информация, найденная в сети по данной теме, а также будет отображён ход моей работы. Милости прошу вступать в группу всех неравнодушных и вносить свой вклад в тему "клонирование на коленке".

 

https://vk.com/meristem


Сообщение отредактировал 1C_Nik: 17 Февраль 2019 - 20:57


#4 Nyima

Nyima

    Редактор

  • Редакторы
  • PipPipPipPipPip
  • 5 494 сообщений
  • Меня зовут:Татьяна
  • Пол:
  • Город:СПб

Отправлено 17 Февраль 2019 - 20:57

Павел, у нас не принято копировать объемные тексты из интернета. Копируются при необходимости только небольшие выдержки. А вот прямую ссылку на источник давать не запрещено (с собственным сопроводительным словом).

 

Вот этот текст откуда? При цитировании ссылка обязательна.



#5 1C_Nik

1C_Nik

    Участник

  • Пользователи
  • PipPipPip
  • 84 сообщений
  • Меня зовут:Павел
  • Пол:
  • Город:Сочи
  • Коллекция:посмотреть

Отправлено 17 Февраль 2019 - 21:01

Понял, объемный сейчас обрежу, ссылку на источник уже указал.



#6 cactus

cactus

    Активный участник

  • Пользователи
  • PipPipPipPipPip
  • 2 287 сообщений
  • Меня зовут:Александр
  • Пол:
  • Город:Киев

Отправлено 17 Февраль 2019 - 21:18

НЕТ! Ничего не обрезайте - у нас всё источники заблокированы!!!

Я могу читать и смотреть только здесь.


Сообщение отредактировал cactus: 17 Февраль 2019 - 21:19


#7 1C_Nik

1C_Nik

    Участник

  • Пользователи
  • PipPipPip
  • 84 сообщений
  • Меня зовут:Павел
  • Пол:
  • Город:Сочи
  • Коллекция:посмотреть

Отправлено 17 Февраль 2019 - 21:19

Вебинар «Современные технологии получения посадочного материала методом клонального микроразмножения»

 



#8 1C_Nik

1C_Nik

    Участник

  • Пользователи
  • PipPipPip
  • 84 сообщений
  • Меня зовут:Павел
  • Пол:
  • Город:Сочи
  • Коллекция:посмотреть

Отправлено 17 Февраль 2019 - 21:21

НЕТ! Ничего не обрезайте - у нас всё источники заблокированы!!!

Я могу читать и смотреть только здесь.

Пришлите в личку Ваш e-mail, я вам текст туда скину.



#9 1C_Nik

1C_Nik

    Участник

  • Пользователи
  • PipPipPip
  • 84 сообщений
  • Меня зовут:Павел
  • Пол:
  • Город:Сочи
  • Коллекция:посмотреть

Отправлено 17 Февраль 2019 - 21:43

статья противницы микроклонального размножения, в которой ставится под сомнение генетическая идентичность микроклонов. Оно и логично, при дезинфекции в клетках экспланта могут происходить мутации, и клон может отличаться от исходного растения. Но по мне, это может быть даже интересно для селекции растений путем микроклонального размножения.

 

http://www.phlox-rel...kroklonloh.html



#10 akr74

akr74

    Спецкорр

  • Корреспонденты
  • PipPipPipPipPip
  • 1 670 сообщений
  • Меня зовут:Александр
  • Пол:
  • Город:г.Пермь

Отправлено 17 Февраль 2019 - 22:21

В нашем ПГНИУ пробуют заниматься микроклональным размножением цитрусов. Материал берут из коллекции ботсада. Я там принимаю активное участие в создании и обновлении коллекции. Иногда, по приглашению, учавствую в мастерклассах по прививкам.
Основа коллекции - переданная мной несколько лет назад часть моей домашней коллекции. Вроде на кафедре физиологии растений биофака даже вышла статья о микроклональном размножении цитрусов. Можно поискать в инете. Я с этими работами не знаком и не интересуюсь. Занимаюсь, в основном, прививками.
Для микроклонального размножения растений требуется спец.лаборатория с соответствующим оборудованием. Думаю, рядовому цитрусоводу это не потянуть, да и особого резона в таком размножении нет. ИМХО, это нужно разве что в научных целях, для обучения студентов, либо для написания статей. Еще, наверное, таким размноженим цитрусов в научных целях занимаются крупные зарубежные питомники в благодатных субтропических странах.

Сообщение отредактировал akr74: 17 Февраль 2019 - 22:28


#11 1C_Nik

1C_Nik

    Участник

  • Пользователи
  • PipPipPip
  • 84 сообщений
  • Меня зовут:Павел
  • Пол:
  • Город:Сочи
  • Коллекция:посмотреть

Отправлено 17 Февраль 2019 - 22:48

В том то и преимущество микроклонального размножения - что не нужны огромные площади для размножения субтропические условия создать в лаборатории вполне под силу.

Рядовой цитрусовод может иметь соответствующую специальность и иметь доступ к лабораторному оборудованию и реактивам на работе.

Одно из преимуществ культуры тканей in vitro - ускорение прохождения ювенильной фазы растений. В селекции цитрусовых это просто булыжник преткновения. Не хватает жизни для выведения перспективных сортов...



#12 Sveta-waw

Sveta-waw

    Активный участник

  • Пользователи
  • PipPipPipPipPip
  • 3 041 сообщений
  • Меня зовут:Светлана
  • Пол:
  • Город:г.Кстово Нижегородская область
  • Коллекция:посмотреть

Отправлено 17 Февраль 2019 - 22:54

Павел, а Вы что закончили, чтобы заниматься биотехнологией и генной инженерией в домашних условиях?



#13 1C_Nik

1C_Nik

    Участник

  • Пользователи
  • PipPipPip
  • 84 сообщений
  • Меня зовут:Павел
  • Пол:
  • Город:Сочи
  • Коллекция:посмотреть

Отправлено 17 Февраль 2019 - 23:22

Павел, а Вы что закончили, чтобы заниматься биотехнологией и генной инженерией в домашних условиях?

 

В тканевой культуре и микроклонировании в чистом виде, генная инженерия - побочный эффект. Примерно на уровне прививки мутировавшей почки.

Специализированного образования именно по биотехнологии и генной инженерии, равно как по химии не имею, но умение получать и применять знания имеется. 

Ничего высоко-технологичного в микроклонировании растений нет, залог успеха - стерильность, правильно приготовленные питательные среды и гормоны вегетативного роста и корнеобразования.

Ну и, естественно, навыки работы в лаборатории должны быть (аккуратность, точность расчетов при приготовлении сред, соблюдение стерильности)



#14 Sveta-waw

Sveta-waw

    Активный участник

  • Пользователи
  • PipPipPipPipPip
  • 3 041 сообщений
  • Меня зовут:Светлана
  • Пол:
  • Город:г.Кстово Нижегородская область
  • Коллекция:посмотреть

Отправлено 17 Февраль 2019 - 23:30

Специализированного образования именно по биотехнологии и генной инженерии, равно как по химии не имею, но умение получать и применять знания имеется. 

 Что-ж, это замечательно.

 Но когда ты учишься по этой специальности 5,5 лет, а потом работаешь по этой специальности 3 года, то становишься скептиком. 



#15 1C_Nik

1C_Nik

    Участник

  • Пользователи
  • PipPipPip
  • 84 сообщений
  • Меня зовут:Павел
  • Пол:
  • Город:Сочи
  • Коллекция:посмотреть

Отправлено 17 Февраль 2019 - 23:39

 ... Но когда ты учишься по этой специальности 5,5 лет, а потом работаешь по этой специальности 3 года, то становишься скептиком. 

 

У Вас профильное образование и опыт работы с тканевыми культурами? Расскажите что именно привело к тому, что Вы относитесь к тканевым культурам со скепсисом?

 

Или Вы со скепсисом относитесь к возможности работы с тканевыми культурами в домашних условиях?



#16 cactus

cactus

    Активный участник

  • Пользователи
  • PipPipPipPipPip
  • 2 287 сообщений
  • Меня зовут:Александр
  • Пол:
  • Город:Киев

Отправлено 17 Февраль 2019 - 23:40

Вот, как хорошо!
Светлана, развейте мои сомнения/подозрения: правда ли, что растения полученные таким образом не долговечны?



#17 1C_Nik

1C_Nik

    Участник

  • Пользователи
  • PipPipPip
  • 84 сообщений
  • Меня зовут:Павел
  • Пол:
  • Город:Сочи
  • Коллекция:посмотреть

Отправлено 17 Февраль 2019 - 23:45

Вот, как хорошо!
Светлана, развейте мои сомнения/подозрения: правда ли, что растения полученные таким образом не долговечны?

Я хоть и не Светлана, могу ответить на Ваш вопрос. В случае если при размножении микроклонированием не произошла мутация группы клеток, то полученное таким способом растение по долговечности будет идентично растению, полученному любым другим вегетативным способом (укоренение черенка, присыпка, воздушная отводка).



#18 Маринамуха

Маринамуха

    Модератор

  • Модераторы
  • PipPipPipPipPip
  • 3 966 сообщений
  • Меня зовут:Марина
  • Пол:
  • Город:г.Светлый Калининградской обл.

Отправлено 17 Февраль 2019 - 23:54

Э-э-э....прошу прощения, что есть присыпка?



#19 1C_Nik

1C_Nik

    Участник

  • Пользователи
  • PipPipPip
  • 84 сообщений
  • Меня зовут:Павел
  • Пол:
  • Город:Сочи
  • Коллекция:посмотреть

Отправлено 17 Февраль 2019 - 23:59

Э-э-э....прошу прощения, что есть присыпка?

 

Видимо мой местечковый сленг, с детства так отводки путем пригибания ветви к грунту, пришпиливания рогатиной и присыпки грунтом называю.  :unknw:



#20 1C_Nik

1C_Nik

    Участник

  • Пользователи
  • PipPipPip
  • 84 сообщений
  • Меня зовут:Павел
  • Пол:
  • Город:Сочи
  • Коллекция:посмотреть

Отправлено 18 Февраль 2019 - 00:14

В нашем ПГНИУ пробуют заниматься микроклональным размножением цитрусов. Материал берут из коллекции ботсада. Я там принимаю активное участие в создании и обновлении коллекции. Иногда, по приглашению, учавствую в мастерклассах по прививкам.
Основа коллекции - переданная мной несколько лет назад часть моей домашней коллекции. Вроде на кафедре физиологии растений биофака даже вышла статья о микроклональном размножении цитрусов. Можно поискать в инете.

 

Спасибо за наводку. Нашел:

Н. Л. Шибанова, М. В. Орлова
Пермский государственный национальный исследовательский университет, Пермь, Россия
МИКРОКЛОНАЛЬНОЕ РАЗМНОЖЕНИЕ CITRUS LIMON (L.) OSBECK СОРТА ПАВЛОВСКИЙ
 

 

http://press.psu.ru/.../view/1909/1449




Количество пользователей, читающих эту тему: 0

0 пользователей, 0 гостей, 0 скрытых пользователей

Copyright © 2019 homecitrus.ru
 

Яндекс.Метрика Яндекс цитирования АгроПоиск - аграрная поисковая система